검사방법 약어

7 RT PCR 역전사 중합효소연쇄반응

Reverse transcriptase polymerase chain reaction

특정 부위의 RNA를 template로 하여 이에 상응하는 cDNA (complementary DNA)를 합성한 다음
이를 이용하여 PCR 증폭을 시행하는 방법이다.
역전사효소(reverse transcriptase)를 이용해 RNA로부터 cDNA를 제조하고, cDNA를 이용해 특정 부위를 증폭시키는 과정으로 나뉘어지며
이 과정은 genomic DNA로 특정 유전자 부위를 증폭시키는 방법과 같다.

6 Sequencing 염기서열분석법

Sequencing

어떤 돌연변이가 선별방법에 의해 검출되었다면
그 돌연변이의 위치와 성상을 알기 위해서는 단일 가닥 DNA상의 염기서열을 분석해야한다.
이 방법의 원리는 DNA polymerase가 상보적인 deoxynucleotides (dNTPs)을 결합시킴으로써 염기서열을 복제해 나갈때,
dideoxynucleotides (ddNTP)를 결합시키는 순간마다 반응이 정지되어 짧은 DNA 조각들이 생성되는 것이다.
염기서열을 알고자하는 부위는 벡터를 이용해 만들어진 cloned DNA 조각이 될 수도 있고 PCR 증폭산물을 직접 사용할 수도 있다.
A, T, G, C라고 표기된 4개의 시험관에 각각 ddATP, ddTTP, ddGTP, ddCTP를 dNTPs와 함께 넣은 다음,
분석하고자 하는 DNA 및 그 DNA의 5'에 상보적인 primer와 DNA polymerase를 첨가하여 반응시킨다.
각 시험관마다 해당하는 염기로 끝나는 다양한 크기의 DNA 조각들이 생성되는데, denaturing gel에 4개의 반응을 각 well별로
전기영동하면 ladder 양상으로 나타나면서 염기서열을 분석할 수 있다. 형광물질 표지를 응용한 자동화된 염기서열 분석기를
널리 이용하고 있다.

5 Shell-vial method Shell-vial method

Shell-vial method

바이러스 분리법의 하나로 피검물질을 목적으로 하는 바이러스를 감수성이 있는 세포에 접종해 저속으로 원심 조작한다.
그 후 24시간 배양을 실시하여 아세톤으로 고정한 후 단일 클론 항체를 이용한
효소 항체법(EIA)이나 형광 항체법(FA) 등을 이용해 바이러스 항원의 유무를 판정한다.
종래의 바이러스 분리가 수 주간 걸리는 것과 비교해 매우 단시간에 바이러스 검출이 가능하며,
임상적으로 바이러스 감염이 확실하나 원인바이러스를 추정할 수 없을 경우 또는 바이러스 중복 감염 시에도
한번에 3~4 종류의 세포에 환자의 검체를 접종하여 원인 바이러스를 정확히 검출할 수 있다는 장점이 있다.

4 Spectrophotometry 분광광도법

Spectrophotometry

빛의 세기나 양을 측정하는 방법으로, 프리즘이나 격자(grating)를 통해 분리된 단색광 영역에서 검체의 흡광도를 측정하여
표준용액의 흡광도와 비교함으로써 검체에 포함된 특정 물질의 농도를 구하는 방법이다.

3 TIA 면역 혼탁법

Turbidimetric immunoassay

검사대상 물체 중 측정 목적물질에 대응하는 항체를 검사대상 물체에 가하면 반응에 의해 항원-항체 복합물이 생성된다.
이 복합물의 탁도는 피검 물질의 항원량과 비례하여,
이 탁도를 측정해 기존 농도의 표준 물질에 의해 작성된 검량선과 비교하는 것으로 농도를 측정하는 방법이다.

2 UVS 자외선 흡광 광도분석법

Ultraviolet spectrophotometry

일반적으로 비색법은 가시광선 영역의 파장을 이용하여 흡광도를 측정하지만, UV법은 조효소의 NADH나 NADPH가 파장이
340nm 부근의 보라색 외부에 최대 흡수를 가지기 때문에 이러한 조효소가 반응계에 관여하는 경우는 UV법을 이용해 정량 검출한다.

1 Western blot Western blot methoed

Western blot methoed

목적하는 단백질을 전기영동에 의해 분획해서 전기적으로 니트로셀률로스막에 전사하고 목적 단백질에 대한 항체를 반응시킨 후
방사성 동위원소 또는 효소로 표식한 항체를 2차 반응시켜 목적 단백질를 검출하는 방법으로 Immunoblot법이라 부른다.