Acrylamide와 bis-acrylamide를 중합시켜서 형성된 gel을 이용하여 전기영동을 하는 검사방법이다.
단백질 입자가 acrylamide의 공극 사이를 지나게 될 때 입자가 큰 것은 진행속도가 느리고 입자가 작은 것은 진행속도가 빠르게 된다.
만일 같은 크기의 입자이면 하전량이 큰 것이 더 빨리 이동하게 되는 원리를 이용하며
일정 시간 동안 움직인 거리에 의해 단백질 종류를 구분하는 방법이다.
DNA의 단편을 증폭하는 방법이다. 목적하는 영역의 DNA을 증폭하기 위해 가열하여 변성시키고 한 개의 쇠사슬구조 DNA로 만든다.
다음에 2종의 primer를 혼합시켜 적당한 온도 조건으로 annealing하면, 각각의 primer는 변성,
DNA와 상보성이 있는 염기로 대를 형성하고, DNA polymerase의 반응에 의해 쇠사슬이 증폭된 것을 측정한다.
RNA를 증폭하는 경우는 역전사 효소(RT, reverse transcriptase)에 의해 cDNA (complementary DNA)로 변환하여 증폭한다.
Hybridization (교잡)은 서로 다른 두 개의 핵산가닥이 상보적 결합을 형성하는 것으로,
DNA 또는 RNA의 단일 사슬 2개를 서로 붙여보는 것을 의미한다.
알고 있는 핵산의 단일가닥을 방사성 동위원소 등으로 형광표지하고, 전사(혹은 복제)산물이 들어있는 곳에 넣은 후
이중 가닥들을 전부 denaturation 시켜 단일가닥으로 만들어 renaturation 될 때 표지된 단일가닥이 붙은 서열을 찾는 방법이다.
PCR 증폭산물의 증가를 실시간으로 모니터링하여 해석하는 기술로 DNA를 증폭시키면서 증폭산물을 분광 형광 광도계로 검출한다.
검출방법은 크게 interchelating법과 형광표식 probe(소식자)를 이용하는 2가지 방법이 있다. PCR 후 단계가 없기 때문에 시간이 단축되고
증폭산물에 의한 오염이 없으며, PCR의 log phage 초기에 분석이 가능해 정량 분석에 매우 유용하다.
이 방법은 감염원의 정량적 검출이나 유전자 발현 정도 및 비정상 mRNA의 정량에 널리 이용된다.
제한효소(restriction endonuclease) 처리에 의한 DNA fragment 길이의 차이를 확인하여 SNP를 typing 하는 방법으로
PCR을 통해 증폭된 DNA fragment 상에 존재하는 SNP 부위가 특정 제한효소에 의하여 구별될 수 있는 경우 이용된다.
증폭된 fragment의 SNP에 의하여 특정 제한효소에 대한 restriction site의 sequence가 달라져
두 SNP allele의 fragment 길이의 차이가 발생하여 agarose gel 상에서 쉽게 확인할 수 있다.
측정원리는 RIA와 같으나 항체 대신 수용체를 사용하고 그 반응성으로 부터 생물활성을 구하는 방법이다.
수용체는 항체와 같은 물질을 검출하기 때문에 일반적인 ligand로 사용한다. 이 외에 생체가 생리활성 물질에 반응하는 과정에서
물질과 수용체의 반응성(수용체 자신의 활성)을 보이는 것이 중요한 목적으로, 생리활성을 구하는 것이 RIA나 EIA법과 차이점이다.